Sadržaj
U znanstvenim laboratorijima provode se kromatografske tehnike za odvajanje kemijskih spojeva od nepoznatog uzorka. Uzorak se otopi u otapalu i teče kroz kolonu u kojoj je razdvojen privlačenjem spoja prema materiji kolone. Ovo polarno i nepolarno privlačenje materijala stupaca je aktivna sila koja uzrokuje odvajanje spojeva tijekom vremena. Dvije vrste korištene kromatografije danas su plinska kromatografija (GC) i tekućinska kromatografija visokih performansi (HPLC).
Faza mobilnog operatera
Plinska kromatografija isparava uzorak, a nosi ga putem sustava pomoću inertnog plina, poput helija. Upotreba vodika proizvodi bolje odvajanje i učinkovitost, ali mnogi laboratoriji zabranjuju uporabu ovog plina zbog njegove zapaljive prirode. Kada se koristi tekuća kromatografija, uzorak ostaje u svom tekućem stanju i gura se kroz kolonu pod visokim pritiscima raznim otapalima, poput vode, metanola ili acetonitrila. Različite koncentracije svakog otapala različito će utjecati na kromatografiju svakog spoja. Ostanak uzorka u tekućem stanju povećava stabilnost spoja.
Vrste stupaca
Stupovi za plinsku kromatografiju imaju vrlo mali unutarnji promjer i njihova duljina može biti od 10 do 45 metara. Ovi stupovi na bazi silike namotani su duž kružnog metalnog okvira i zagrijani na temperaturu od 250 stupnjeva Fahrenheita. Stupovi s tekućom kromatografijom također su na bazi silike, ali imaju debelo metalno kućište koje može podnijeti visoke količine unutarnjeg tlaka. Ovi stupci djeluju na sobnoj temperaturi i duljine su od 50 do 250 centimetara.
Složena stabilnost
U plinskoj kromatografiji uzorak ubrizgan u sustav isparava se na oko 400 stupnjeva Farenhajta prije nego što se prenese kroz kolonu. Stoga spoj mora biti u stanju podnijeti toplinu pri visokim temperaturama bez propadanja ili razgradnje u drugu molekulu. Tekući kromatografski sustavi omogućavaju znanstveniku analizu većih i manje stabilnih spojeva, jer uzorak nije izložen toplini.