Sadržaj
- Svjetlosna mikroskopija i stanična biologija
- Deseci eksperimentalnih postupaka razvijeni
- Kemijske mrlje i svjetlosna mikroskopija
- Jednostavnost zumiranja
- Prednosti fluorescentne mikroskopije
- Nedostatak svjetlosnih mikroskopa
Svjetlo ili složeni mikroskop alat je s kojim se vjerojatno susreće svaki student biologije. Razumijevanje prednosti svjetlosnog mikroskopa dat će uvid u savladavanje njegove korisnosti za učionicu ili kliniku. Mnoge eksperimentalne tehnike koje su usavršene za upotrebu svjetlosnim mikroskopom, jednostavnost upotrebe i njegova relativno pristupačna cijena u usporedbi s drugim vrstama mikroskopa čine ga preferiranim izborom za mnoge primjene nauke o životu.
Svjetlosna mikroskopija i stanična biologija
Budući da se stanice ne mogu gledati bespomoćnim okom, mikroskopija je ključna komponenta za proučavanje strukture i funkcije stanica. Svjetlosni mikroskop koristi izvor svjetlosti za osvjetljavanje uzorka na svijetlom polju. Uzorak se mrlje kako bi strukture koje su normalno prozirne ili gotovo bezbojne tamnije od pozadine i lakše vidljive. Druga tehnika mikroskopije je fluorescentna mikroskopija. Umjesto da na svijetloj pozadini koristite tamnu mrlju, stanice se oboje fluorescentnim bojama i gledaju na tamnoj pozadini.
Deseci eksperimentalnih postupaka razvijeni
Proučavanje tkiva laganom mikroskopijom prakticira se više od 50 godina. Lagana mikroskopija je najpristupačniji oblik mikroskopije u cijelom svijetu i još uvijek je jedan od glavnih alata za treniranje patologa ili liječnika koji dijagnosticiraju bolesti ispitivanjem mikroskopske strukture tkiva. Tisuće laboratorija širom svijeta usavršilo je na desetine eksperimentalnih postupaka, a mnogi od njih dostupni su u slobodnoj prodaji. Kombinacija niskih troškova i velike količine bioloških informacija koje svjetlosni mikroskop pruža čini neprocjenjivim alatom za istraživanje i medicinu.
Kemijske mrlje i svjetlosna mikroskopija
Za promatranje uzorka pod laganom mikroskopijom potrebna je pomoć šarenih kemijskih mrlja. Ove plave, crvene, zelene i smeđe mrlje fiksirane su na tkivo s jasnim kemikalijama koje se nazivaju permount, koje otvrdnjava kad su izložene zraku. Tako kombinirani, te kemijske mrlje i tkiva traju dugi niz godina bez izblijedjivanja, omogućujući znanstvenicima ispitivanje istog uzorka dulje vrijeme bez gubitka boje. Gubitak vidljivosti ograničenje je fluorescentne mikroskopije jer fluorescentne boje vremenom blijede.
Jednostavnost zumiranja
Sposobnost mikroskopa da lako zumira između promatranja repa male ribe 50 puta veće od stvarne veličine do gledanja arterija u repu 400 puta veće od stvarne veličine ne može se usporediti s drugim vrstama mikroskopa. Patolozi pregledavaju biopsije, ili sitne komade tkiva uklonjenim iglom, pod složenim mikroskopom i često zumiraju i umanjuju kako bi dali svoju najbolju procjenu. Sastavljeni svjetlosni mikroskop ostaje najbolja opcija za ovu vrstu istraživanja.
Prednosti fluorescentne mikroskopije
Fluorescentna mikroskopija omogućuje gledatelju veće vizualne detalje, jer fluorescentna bojila mogu ciljati određene strukture unutar stanice. Fluorescentne molekule u uzorku ćelije zvane fluorofori apsorbiraju svjetlost u jednoj valnoj duljini i emitiraju svjetlost različite valne duljine. Fluorescentna bojila mogu se koristiti sa specifičnim proteinima i antitijelima kako bi se istakle strukture, pa čak i pojedinačne molekule unutar stanice. Tehnike fluorescentne mikroskopije omogućuju upotrebu više boja u uzorku.
Nedostatak svjetlosnih mikroskopa
Tehnologija mikroskopije eksplodirala je posljednjih desetljeća, a neki od naprednijih mikroskopa daju detaljnije informacije od klasičnog složenog (svjetlosnog) mikroskopa. Fluorescentni mikroskopi omogućavaju znanstvenicima da vide dva različita proteina na istom mjestu u ćeliji koristeći crvene i zelene markere koji se preklapaju i oblikuju žutu boju. Elektronski mikroskopi prikazuju trodimenzionalne značajke ćelijske površine. Da nazovemo jedan nedostatak svjetlosnog mikroskopa, on ne posjeduje neke napredne mogućnosti fluorescentne ili elektronske mikroskopije jer koristi samo bijelu svjetlost. Međutim, elektronski mikroskopi i fluorescentni mikroskopi kreću se u cijenama od desetaka tisuća do stotina tisuća dolara, dok se složeni mikroskop trenutno može kupiti za samo 100 dolara.