Sadržaj
CFU znači Colony Forming Unit, mikrobiološki izraz koji se koristi za kvantificiranje koliko bakterija postoji u otopini. Ovisno o koncentraciji vašeg uzorka, trebate napraviti više razrjeđenja i staviti različite uzorke na petrijeve posude. Ako imate previše bakterijskih kolonija, teško ih je prebrojati, a ako ih je premalo, uzorak možda neće biti reprezentativan. Općenito je dobra ideja da se prvo stavi originalna otopina, zatim 1/10 razrjeđivanje (1 dio otopine, 9 dijelova fiziološke otopine), 1/100 razrjeđenje i eventualno 1 000 otopina.
Izračunavanje CFU-a iz razrjeđenja bakterija
Provedite preliminarno brojanje svakog jela nakon što se bakterija inkubira, što obično traje jedan ili dva dana. Brojite samo pojedine kolonije, koje bi trebale biti različite, izolirane točkice, a ne cijelu mrlju različitih kolonija odraslih zajedno. Odaberite ploču koja ima više od 30 tih kolonija, ali manje od 300.
Prebrojite broj pojedinačnih kolonija. Ovo je CFU broj vašeg razrjeđenja - morat ćete izvršiti jednostavan proračun da biste odredili CFU izvornog uzorka. Za ovaj primjer koristite hipotetsku ploču koja sadrži 46 kolonija.
Odredite veličinu razrjeđenja koje ste koristili. (U idealnom slučaju, da biste je na vrijeme označili petrijevim posudama.) Za ovaj primjer, pomiješajte 1 ml bakterijske kulture s 99 ml fiziološke otopine. Ovo je razrjeđivanje 1/100.
Pomnožite stupanj razrjeđivanja s količinom koju ste zapravo posipali. Ako ste na agar stavili 0,1 ml svoje otopine od 1/100, pomnožite 0,1 x 1/100 za rezultat 1/1000 ili 0,001.
Podijelite CFU razrjeđenja (broj kolonija koje ste prebrojali) na osnovu rezultata iz koraka 4. U ovom primjeru radite 46 ÷ 1/1000, što je isto kao 46 x 1.000. Rezultat je 46 000 CFU u izvornom uzorku.