Sadržaj
- Općenita ekstrakcija DNA
- Stanice biljaka i životinja
- Ekstrakcija biljne DNA
- Ekstrakcija životinjske DNA
- DNK razlike
Struktura dvolančane DNK univerzalna je u svim živim stanicama, ali postoje razlike u metodama ekstrakcije genomske DNK iz životinjskih i biljnih stanica. Iako genomska DNK živi u jezgri stanica, količina i čistoća izvučene DNK ovise o vrsti i veličini stanice. Primjerice, određene stanice sadrže više DNK i nečistoća od drugih. Čitajte dalje kako biste saznali više o razlikama u ekstrakciji DNK.
Općenita ekstrakcija DNA
Ako biljne i životinjske stanice obrađujete sapunom, to će razgraditi lipide u staničnoj i nuklearnoj membrani. Zatim će se DNA smjesa odvojiti od staničnih membrana i proteina. Zatim možete upotrijebiti alkohol da istaloži DNK u otopini. Ovisno o količini u uzorku, DNA može biti vidljiva golim okom. Međutim, imajte na umu da ovaj jednostavan postupak ne mora nužno proizvesti DNK visoke čistoće.
Stanice biljaka i životinja
Stanice biljaka razlikuju se od životinjskih stanica po krutoj staničnoj stijenci i organelama poput kloroplasta. Sadrže i bjelančevine i enzime koji igraju ulogu u fotosintezi. Neke biljne stanice imaju poliploidiju, što znači da imaju više primjeraka svakog kromosoma po stanici. Uz to, stanični procesi koji se događaju u biljkama kao što je fotosinteza stvaraju niz sekundarnih metabolita. Životinjske stanice nemaju staničnu stijenku, ali još uvijek trebaju kemikalije poput natrijevog dodecil sulfata (SDS) kako bi poremetile staničnu membranu da bi se oslobodila genomska DNK.
Ekstrakcija biljne DNA
Biljni genomsku DNK teže je izdvojiti zbog biljne stijenke. Možete je ukloniti homogenizacijom ili dodavanjem celulaze da razgradite celulozu koja čini staničnu stijenku. Uz to, metaboliti prisutni u biljnoj stanici mogu ometati ekstrakciju genomske DNK kontaminiranjem DNK uzorka tijekom postupka taloženja.
Ekstrakcija životinjske DNA
Periferni leukociti u krvi su glavni izvor životinjske genomske DNK, ali prikupljanje uzoraka je teško jer krv mora doći izravno iz životinje. Krv sadrži niz spojeva poput proteina, lipida, bijelih krvnih zrnaca, crvenih krvnih zrnaca, trombocita i plazme koji mogu kontaminirati DNK uzorak. Međutim, primarni kontaminant životinjske DNK izvađen iz uzoraka krvi je heme, koji je neproteinska komponenta hemoglobina.
DNK razlike
Razlike između biljne i životinjske DNA leže u redoslijedu baza u spirali. Spojevi koji se nalaze u biljnim stanicama ne postoje u životinjskim stanicama, a slijed DNK baze to odražava. Također, genomska biljna DNA često je veća od životinjske DNK. Te razlike također utječu na metode ekstrakcije, prinos i čistoću DNA.