Sadržaj
Znanstvenici i istraživači proučavaju rast bakterija pripremajući kulture u laboratoriju. Petrijeve posude koje sadrže hranjivi agar uzgajaju bakterijske kulture jednim potezom ili inokulacijom. Studenti mogu pripremiti hranjivi agar kod kuće koristeći zalihe namirnica ili trgovina zdravom hranom za projekt znanstvenog sajma. Konvencionalni kuhinjski uređaji i osnovni kuhinjski pribor daju alat za pripremu sterilnog medija za kulturu koji se može staviti u petrijeve posude. Slijedeći sterilne tehnike zagrijavanjem materijala i održavanjem površina čistim i suhim poboljšati će rezultate sprečavanjem plijesni i čestica da kontaminiraju kulturu.
Filter za kavu stavite u cjedilo i objesite cjedilo preko otvora prozirne posude.
Polako ulijte juhu u filter, pazeći da juha ne prelije sa bočnih strana filtra. Ako se filter začepi česticama, uklonite rabljeni filter, zamijenite čistim filtrom i nastavite s izlijevanjem juhe.
Uklonite cjedilo i filtrirajte s vrha posude i promatrajte hoće li juha biti bistra (tj. Nema suspendiranih čestica u tekućini). Ako čestice lebde u tekućini, ponovite korake 1 i 2 koristeći drugu prozirnu zdjelu i filter svježe kave.
Stavite lonac na štednjak i ulijte bistru juhu u lonac.
U posudu s juhom dodajte 16 unci destilirane vode.
Uključite štednjak i prilagodite toplinu na srednje nisku. Zagrijte juhu na laganoj vatri (tj. Mali se mjehurići pojavljuju u blizini boce lonca).
Dodajte 1 žličicu agar-agar praha u juhu za kuhanje (otprilike 2,5 grama) i miješajte smjesu dok se prašak ne otopi. Prašak promiješajte da se prašak otopi i spriječite da želatina potone na dno posude (gdje može izgorjeti).
Ponavljajte korak 7 dok se sav agar-agar prah ne otopi u juhi.
Nastavite miješati juhu oko 1 minute kako biste osigurali da se sav prah potpuno otopi.
Isključite štednjak, stavite poklopac na lonac i ostavite da se tekućina ohladi najmanje 15 minuta.
Sterilnu petrijevu posudu rasporedite za red radi lakšeg sastavljanja, ali ne uklanjajte poklopce. Ako želite, stavite trikot da drži toplu posudu. Ako koristite poklopljene kremice od kvasca umjesto petrijevih posuda, sterilizirajte šalice kvasine stavljajući šalice i poklopce okrenute (naopako) na lim obložen folijom i pecite u pećnici najmanje jedan sat na 375 stupnjeva Fahrenheita. Prije upotrebe osigurajte da se sterilizirani šalice i poklopci potpuno ohlade.
Pažljivo dodirnite vanjsku stranu lonca kako biste provjerili je li topla na dodir i stavite lonac na trivet. Ako je lonac previše vruć na dodir, pričekajte barem 10 minuta da se lonac ohladi.
Skinite poklopac i odložite. Stavite lonac u lonac.
Uklonite poklopac iz jedne petrijeve posude i napunite hranjivu juhu da bi posudu napunila na pola. Posudu odmah pokriti poklopcem.
Ponovite korak 14 za svaku petrijevu posudu.
Ostavite hranjivu juhu da se očvrsne u petrijevoj posudi najmanje 1 sat, nesmetano.
Nježno protresite petrijeve posude bočno kako biste provjerili je li se hranjivi juha potpuno očvrsnuo. Ako juha nije potpuno gelirana, pričekajte još 20 minuta prije ponovne provjere.
Pokrijte stol ili ravnu površinu valjkom papirnih ručnika kako biste stvorili sterilno radno područje. Odtrgajte list papirnatog ručnika i preklopite ga četiri puta kako biste stvorili gust, pravokutni valjak. Namjestite ovaj valjak na jedan kraj radnog područja.
Prebacite jednu petrijevu posudu u sterilno radno područje i uklonite poklopac. Posudu pažljivo okrenite i stavite jedan kraj sa presavijenom vatom tako da leži okrenuto i lagano ugaono (s malim razmakom prema vatri za ručni papir).
Okrenite poklopac i stavite ga iznad Petrijeve posude na sterilnu radnu površinu. Ako se kapke vode pojave na poklopcu, nježno otresite vlagu prije stavljanja na pokrivenu površinu, ali ne dirajte unutrašnjost poklopca.
Ponovite korake 19 i 20 za svaki petrijev tanjur, tako što ćete jednu stranu okrenutog tanjura postaviti na bočnu stranu prethodnog posuđa, a ne navlaku za ručni papir. Posuđe će se pojaviti kao razmaknut, s prazninama na jednoj strani kako bi višak vlage mogao ispariti.
Pogledajte pretvorene petrijeve posude kako biste provjerili je li vlaga na stranama tanjura ispala. Nakon što se očisti sva vlaga, okrenite ploče s desne strane prema gore i odmah pokrijte poklopcima za upotrebu.
Inokulirajte hranjivi agar na ploču brisanjem brisom koji sadrži željenu kulturu na površini hranjivog agara prije nego što ga pokrijete poklopcem. Okrenite petrijevu posudu tako da kruta tlo bude na vrhu. Spremite inokuliranu petrijevu posudu s krutinom na vrhu za obradu i poklopcem na dnu da biste ulovili vlagu, labave čestice ili rast.