Kalibracijske krivulje koriste se za određivanje koncentracije nepoznatih tvari na temelju prethodnih mjerenja otopina poznatih koncentracija. Preciznost i točnost mjerenja ovise o krivulji kalibracije. Što je bolja krivulja točniji je odgovor, lošija je krivulja i lošija je točnost. Ovo je vrsta metode usporedbe, nepoznato se uspoređuje s poznatim.Kalibracijske krivulje koriste se za sve vrste mjerenja pomoću mnogih različitih strojeva. U ovom primjeru se koristi spektrofotometar.
Standardnu otopinu razrijedite u različitim koncentracijama. Tipično je napraviti 10 puta razrjeđivanje, 20 puta razrjeđenje, 30 puta razrjeđenje ili neku drugu korak korak mudru otopinu. Svako razrjeđenje napravite dva puta tako da svi uzorci budu u duplikatu.
Izračunajte koncentracije razrijeđenih otopina. Primjer nove koncentracije za 10-puta razrjeđivanje bila bi koncentracija prve otopine pomnožena s 0,10.
Na spektrofotometru očitajte apsorpciju razrijeđenih otopina. Umetnite kivetu u spektrofotometar tako da je oznaka trokuta uskladjena sa stazom svjetlosti. Zatvorite poklopac spektrofotometra i pritisnite gumb nula. Nulti stroj s destiliranom vodom svakih pet uzoraka. Nakon što je stroj zablokiran, pročitajte uzorke na isti način. Jedna je razlika što pritisnete enter da biste postigli apsorpciju. Pritisnite enter nakon što zatvorite poklopac. Zapišite ove vrijednosti u bilježnicu.
Grafikujte apsorpciju prema izračunatim poznatim koncentracijama za sve uzorke. Poznata koncentracija bit će na osi X, a apsorpcija na osi Y. Najbolje je stvoriti graf u programu računalnog graficiranja.
Koristite grafički program za izračunavanje regresijske crte za uhvaćene točke. Za svako razrjeđivanje moguće je izbrisati jednu od dvije točke kako bi se dobila najbolja regresijska linija. To je smisao svakog razrjeđivanja u duplikatu. Što se R ^ 2 bliži vrijednosti, to je bolja linija regresije. Zabilježite jednadžbu regresijske linije.
Na spektrofotometru očitajte apsorpciju nepoznate koncentracije. Zabilježite ovu apsorpciju.
Izračunajte koncentraciju nepoznate otopine pomoću jednadžbe regresijske linije. Nepoznata apsorpcija je supstituirana kao Y u jednadžbi. Riješite jednadžbu za X, koncentraciju.