Sadržaj
- Antibiotici i kako djeluju
- Ispitivanje otpornosti na antibiotike
- Kirby-Bauerov test
- Kako izmjeriti zonu inhibicije
Bakterije su neke od najzastupljenijih organizama na Zemlji. Znanstvenici procjenjuju da ih ima preko jednu bilion različitih vrsta od bakterija, u iznosu od preko pet milijuna biliona biliona (da, to su dva odvojena trilijuna) pojedinci na planeti.
Od svih tih bakterija, manje od 1 posto uzrokovati bolest kod ljudi. Te se bolesti mogu kretati od stomačnih smetnji, kao što možete dobiti od blage infekcije, do ozbiljnih i smrtnih bolesti poput bubbonske kuge (uzrokovane Yersinia pestis bakterija) koji su ubili 50 milijuna ljudi u 14. stoljeću.
To je razlog zašto je otkriće antibiotika, lijekova koji uklanjaju bakterije, spasilo toliko života. Problem s bakterijama je u tome što se oni brzo prilagođavaju i evoluiraju, što dovodi do pojave sve češćih sojeva bakterija otpornih na antibiotike. Mjerenje zona inhibicije jer soj bakterija može reći znanstvenicima i liječnicima da li je rezistentan na antibiotik.
Antibiotici i kako djeluju
Antibiotici su lijekovi koji ubijaju bakterije. Oni djeluju ciljano i rezultiraju smrću bakterijskih stanica, a ljudske stanice ostavljaju same. Svaki antibiotik djeluje na malo drugačiji način ciljajući specifične strukture bakterija i signalizirajući ih da ih eliminira.
Na primjer, penicilin (jedan od najpoznatijih antibiotika) interferira sa stanicama bakterijskih stanica, što dovodi do toga da ne funkcioniraju pravilno i, na taj način, umiru. Lijekovi koji djeluju ovako se nazivaju beta-laktamski antibiotici.
Makrolidni antibiotici ciljni bakterijski ribosomi. To sprečava bakterije da sintetiziraju proteine, što znači da bakterije ne mogu preživjeti. Čest je primjer eritromicin, antibiotik koji se koristi za liječenje raznih infekcija, uključujući bronhitis i brojne infekcije kože.
Kinolonski antibiotici su druga uobičajena vrsta antibiotika koja djeluje interferirajući s bakterijskom DNK.
Ispitivanje otpornosti na antibiotike
Nakon početnog otkrića antibiotika u 1920-ima, znanstvenici su brzo shvatili da se bakterije razvijaju kao otporne na lijekove. Mnogi su znanstvenici pokušali stvoriti metode koje bi im omogućile testiranje koliko su osjetljivi bakterijski sojevi na antibiotike kako bi razumjeli s čime se bave, da tako kažemo.
Početni testovi uključivali su serijska razrjeđenja bakterijskog bujona na ploče s različitim koncentracijama antibiotika da bi se utvrdila osjetljivost. Međutim, ova je metoda trajala dugo vremena.
Kirby-Bauerov test
Eto gdje Kirby-Bauerov test dolazi. Ovu su metodu standardizirali mikrobiolozi W. M. M. Kirby i A. W. Bauer. Njihov test uzima čistu bakterijsku kulturu i stavlja ga na ploču s agarima. Zatim se na ploču sa agarima postavlja mali disk infuziran antibioticima (koji se prikladno naziva antibiotički disk). Oko tanjura se postavljaju razni diskovi s različitim antibioticima, a bakterije se ostavljaju da se inkubiraju određeno vrijeme.
Nakon što se disk postavi na ploču, antibiotici će početi difuzno djelovati. Ako je bakterija koja se proučava osjetljiva na antibiotik, tada nikakve bakterije neće rasti blizu diska jer će ih lijekovi ubiti.
Kako se odmičete dalje od diska s antibioticima, koncentracija antibiotika će se smanjivati. Na određenoj udaljenosti od diska počet ćete opet vidjeti rast bakterija jer je koncentracija antibiotika preniska da bi utjecala na bakterije.
Područje oko diska antibiotika koji nema rast bakterija poznato je kao zona inhibicije. Zona inhibicije je jednoliko kružna zona bez rasta bakterija oko diska antibiotika. Što je ova zona veća, bakterije su osjetljivije na taj antibiotik. Što je zona manja, to su otpornije (a time i manje osjetljive) bakterije.
Kako izmjeriti zonu inhibicije
Osim imenovanja ove prakse i protokola, znanstvenici Kirby i Bauer također su stvorili standardizirane karte koje su koristile promjer zone inhibicije kako bi odredile osjetljivost ili otpornost bakterija na bakterije.
Ove tablice možete pronaći ovdje i koristiti bakterijske vrste, vrstu korištenog antibiotika i promjer inhibicije kako bi se utvrdilo jesu li bakterije rezistentne, srednje osjetljive ili osjetljive na taj antibiotik.
Bilješka: Uvijek mjerite zonu inhibicije u milimetrima.
Da biste izmjerili zonu inhibicije, najprije stavite ploču na površinu koja nije reflektirajuća. Uzmite ravnalo ili čeljust koji mjere u milimetrima i postavite "0" u sredinu diska s antibioticima. Izmjerite od središta diska do ruba područja s nultim rastom. Uzmite svoje mjerenje u milimetrima.
Ovo mjeri radius zone inhibicije. Pomnožite to s dva kako biste dobili promjer.
Također možete izravno izmjeriti preko zone inhibicije od ruba do ruba prelaska kroz središte diska antibiotika da biste izravno izmjerili promjer umjesto mjerenja polumjera.