Sadržaj
Ljekari često koriste instrument poznat kao ultraljubičasto vidljiv ili UV-Vis, spektrometar za mjerenje količine ultraljubičastog i vidljivog zračenja koje apsorbiraju spojevi. Količina ultraljubičastog ili vidljivog zračenja spoja ovisi o tri faktora: koncentraciji, c, u uzorku; duljina puta držača uzorka, l, koja određuje udaljenost u kojoj uzorak i zračenje djeluju; i koeficijent molarne apsorpcije, e, koji se ponekad naziva i molarni koeficijent izumiranja. Jednadžba je navedena kao A = ecl i poznata je kao Beer's law. Jednadžba tako sadrži četiri varijable, a za određivanje bilo koje od četiri potrebne su poznate vrijednosti za tri.
izračuni
Odredite apsorbanciju spoja pri željenoj valnoj duljini. Te se informacije mogu izvući iz spektra apsorpcije proizvedenog bilo kojim standardnim UV-Vis instrumentom. Spektri se obično crtaju kao apsorbancija u odnosu na valnu duljinu u nanometarima. Općenito, pojava bilo kakvih "vrhova" u spektru ukazuje na valnu duljinu koja nas zanima.
Izračunajte koncentraciju uzorka u molovima na litru, mol / L, također poznat kao molarnost, M. Opća jednadžba molarnosti je
M = (grami uzorka) / (molekulska masa spoja) / litara otopine.
Na primjer, uzorak koji sadrži 0,10 grama tetrafenilciklopentadienona, molekulske mase 384 grama po molu, otopljenog i razrijeđenog u metanolu do konačnog volumena od 1,00 litra, pokazivao bi molarnost od:
M = (0,10 g) / (384 g / mol) / (1,00 L) = 0,00026 mol / L.
Odredite duljinu putanje kroz držač uzorka. U većini slučajeva to je 1,0 cm. Moguće su i druge duljine puta, posebno kada se radi o držačima za uzorke namijenjenim plinovitim uzorcima. Mnogi spektroskopski stručnjaci uključuju duljinu puta s podacima o uzorku uređenim na apsorpcijski spektar.
Izračunajte koeficijent molarne apsorpcije prema jednadžbi A = ecl, gdje je A apsorbancija, c je koncentracija u molovima po litri, a l je duljina staze u centimetrima. Riješena za e, ova jednadžba postaje e = A / (cl). Nastavljajući primjer iz koraka 2, tetrafenilciklopentadienon pokazuje dva maksimuma u svom apsorbancijskom spektru: 343 nm i 512 nm. Ako je duljina staze 1,0 cm, a apsorbancija na 343 bila 0,89, tada
e (343) = A / (cl) = 0,89 / (0,00026 * 1,0) = 3423
A za apsorpciju 0,35 na 512 nm,
e (512) = 0,35 / (0,00026 * 1,0) = 1346.